Calculadora de Concentração de Proteína

Categoria: Biologia
- April 04, 2025
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Valores típicos variam de 0.5 a 2.0
Cuvetes padrão têm um comprimento de caminho de 1 cm
Se a amostra foi diluída antes da medição (por exemplo, 5 = diluição 1:5)

A concentração de proteína usando a absorbância a 280 nm (A280) é determinada usando a Lei de Beer-Lambert:

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

onde:

  • \( C \) = Concentração de proteína (mg/mL)
  • \( A \) = Absorbância a 280 nm
  • \( \epsilon \) = Coeficiente de extinção (L·g⁻¹·cm⁻¹)
  • \( l \) = Comprimento do caminho da cubeta (cm)

O que é o Calculador de Concentração de Proteína?

O Calculador de Concentração de Proteína ajuda a determinar a concentração de proteína usando diferentes métodos, incluindo:

  • Absorbância a 280 nm (A280): Um método rápido e não destrutivo baseado em aminoácidos aromáticos.
  • Ensaios de Bradford: Um método colorimétrico usando ligação de corante.
  • Ensaios BCA (Ácido Bicinchonínico): Um método que se baseia na redução do cobre e na detecção colorimétrica.
  • Ensaios de Lowry: Uma abordagem bem estabelecida usando interações proteína-cobre.

Como Usar o Calculador

Siga estas etapas para calcular a concentração de proteína:

  • Selecione o método de medição (A280, Bradford, BCA ou Lowry).
  • Insira os valores necessários, como absorbância, fator de diluição e coeficiente de extinção (se necessário).
  • Se estiver usando um método de curva padrão (Bradford, BCA ou Lowry), insira os parâmetros da curva.
  • Clique no botão "Calcular" para obter o resultado da concentração.

Benefícios de Usar o Calculador

  • Economiza tempo automatizando os cálculos de concentração.
  • Suporta múltiplos métodos de medição para flexibilidade.
  • Inclui um calculador de diluição para preparar concentrações específicas.
  • Reduz erros humanos em cálculos manuais.

Perguntas Frequentes

1. Quão preciso é o método de Absorbância (A280)?

O método A280 é geralmente preciso para proteínas puras, mas pode ser afetado por contaminantes como ácidos nucleicos.

2. Posso usar o Ensaios de Bradford para todas as proteínas?

O Ensaios de Bradford funciona bem para a maioria das proteínas, mas pode dar resultados variáveis dependendo da composição da proteína.

3. Qual é a vantagem do Ensaios BCA?

O método BCA é mais compatível com detergentes e tem uma faixa linear mais ampla do que o Bradford.

4. Como escolho o coeficiente de extinção correto para A280?

Use valores publicados para proteínas conhecidas ou calcule o coeficiente de extinção com base na composição de aminoácidos.

5. Por que preciso de um fator de diluição?

Se sua amostra estiver diluída antes da medição, você deve multiplicar a concentração calculada pelo fator de diluição para obter a concentração final correta.